(Действующий) Межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 10718-2018 "Пробки корковые....

Докипедия просит пользователей использовать в своей электронной переписке скопированные части текстов нормативных документов. Автоматически генерируемые обратные ссылки на источник информации, доставят удовольствие вашим адресатам.

Действующий
При использовании системы для фильтрации, которую предстоит стерилизовать, и сухих питательных сред испытание проводят по 10.3.
10.2 Экспресс-определение с использованием стерильной фильтрационной системы и готовых к применению стерильных питательных сред
10.2.1 Подготовка
Готовят фильтрационную систему (см. 6.1.1).
10.2.2 Посев на среду WLD
Подсоединяют наполненную воронку со стерильной мембраной к фильтрационной головке вакуумного насоса. В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соответствии с разделом 9. По окончании фильтрации отключают вакуум от линии отсасывания, чтобы установить равновесие с атмосферным давлением.
В среду WLD (5.2) непосредственно перед посевом добавляют дифенил (5.8), растворенный в 10 %-ном растворе этилового спирта, до достижения концентрации дифенила 30 млн-1. Вносят в воронку среду WLD, содержащуюся в ампуле, ненадолго подключают к вакууму для отсасывания, затем отключают вакуум. Удаляют фильтрационную установку и вставляют пробку фильтрационной системы в ее основание, чтобы не допустить реинфицирования. Убирают цилиндрическую часть воронки. Снимают крышку воронки и устанавливают ее на узел фильтр/чашка Петри.
Эту процедуру повторяют с каждой колбой.
10.2.3 Посев на среду M-Green
Подсоединяют наполненную воронку со стерильной мембраной к фильтрационной головке вакуумного насоса. В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соответствии с разделом 9.
По окончании фильтрации отключают вакуум от линии отсасывания, чтобы установить равновесие с атмосферным давлением.
Добавляют в воронку питательную среду M-Green (5.3), содержащуюся в ампуле, ненадолго подключают к вакууму для отсасывания и затем отключают вакуум. Удаляют фильтрационную установку и вставляют пробку фильтрационной системы в ее основание, чтобы не допустить реинфицирования. Убирают цилиндрическую часть воронки. Снимают крышку воронки и устанавливают ее на узел фильтр/чашка Петри. Эту процедуру повторяют с каждой колбой. Сухую питательную среду на мембране вновь растворяют с использованием стерилизованной деминерализованной воды.
10.3 Определение с использованием системы для фильтрации, подлежащей стерилизации, и сухих питательных сред
10.3.1 Подготовка сред
Готовят и стерилизуют среды WLD (5.2) и M-Green (5.3) в соответствии с инструкциями изготовителя.
В среду WLD добавляют дифенил (5.8), растворенный в 10 %-ном растворе этилового спирта, до достижения концентрации дифенила 30 млн-1.
Готовят чашки Петри.
10.3.2 Подготовка системы для фильтрации
Стерилизуют и готовят фильтрационную систему (см. 6.1.2)
10.3.3 Посев на среду WLD
В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соответствии с разделом 9, используя стерильную мембрану.
Помещают мембрану на чашку Петри со средой WLD.
Данную процедуру проводят с каждой колбой.
10.3.4 Посев на среду M-Green
В асептических условиях фильтруют экстракционный раствор, приготовленный в соответствии с разделом 9, используя стерильную мембрану.
Помещают мембрану на чашку Петри со средой M-Green.
Данную процедуру проводят с каждой колбой.

11 Контрольные испытания

Готовят контрольное испытание для каждой среды.

12 Инкубация

Переворачивают чашки Петри со средами WLD и M-Green и выдерживают в термостате (6.2) при температуре (30   2) °С в течение трех дней.
Наблюдают за ростом и подсчитывают колонии на каждой чашке минимум каждые 24 ч.

13 Обработка результатов

13.1 Определение числа КОЕ бактерий на корковой пробке
По окончании заданного инкубационного периода подсчитывают колонии бактерий на каждой чашке со средой WLD, каждый раз сравнивая результат с последним действительным подсчетом.
Для каждой чашки число колониеобразующих единиц (КОЕ) на корковой пробке определяют по формуле
,
(1)
где - общее число подсчитанных колоний бактерий;
4 - число испытанных корковых пробок.
За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение результатов, полученных для каждой чашки, округленное в большую сторону до ближайшего целого числа.
13.2 Определение числа КОЕ дрожжей и плесеней на корковой пробке
После окончания инкубации подсчитывают колонии дрожжей и плесеней на каждой чашке со средой M-Green, каждый раз сравнивая результат с результатом предыдущего подсчета.
Для каждой чашки число колониеобразующих единиц (КОЕ) на корковой пробке определяют по следующей формуле
,
(2)
где - общее число подсчитанных колоний дрожжей и плесеней;
4 - число испытанных корковых пробок.
За результат испытания принимают среднеарифметическое значение результатов, полученных для каждой чашки, округленное в большую сторону до ближайшего целого числа.

14 Протокол испытаний